Enzyme-Reagenz ClonExpress MultiS

für PCR

Die ClonExpress®-Technologie ist eine einfache, schnelle und effiziente Technologie zum nahtlosen Klonen von DNA, mit der das Insert in jede beliebige Position eines beliebigen Vektors geklont werden kann. Verwenden Sie eine beliebige Methode zur Linearisierung des Vektors und führen Sie eine vorwärts/rückwärts gerichtete PCR mit dem Insert durch. Das 5'-Ende des Primers wird in die Endsequenz des linearisierten Vektors eingeführt, so dass die 5'- und 3'-Enden des PCR-Produkts die gleiche Sequenz (15 bp-20 bp) aufweisen wie die beiden Enden des linearisierten Vektors. Nachdem das PCR-Produkt der Sequenz und der linearisierte Vektor in einem bestimmten Verhältnis gemischt wurden, kann die Reaktion unter der Katalyse der Rekombinase bei 37°C für 30 Minuten durchgeführt werden, um die gerichtete Klonierung abzuschließen. Als eine neue Generation von Rekombinationsklonierungs-Kits ist ClonExpress® MultiS speziell für Multi-Fragment-Rekombinationsreaktionen optimiert, die eine sequenzielle Spleißklonierung von bis zu fünf Inserts gleichzeitig realisieren können. Das einzigartige nicht-ligase-abhängige System des Kits reduziert den Hintergrund der Vektor-Selbstligation erheblich und muss die Enzym-Spaltstelle, die vom Insert selbst getragen wird, nicht berücksichtigen. Der hoch optimierte Reaktionspuffer und die verbesserte Rekombinase Exnase MultiS können die Rekombinations-Effizienz des Klons erheblich verbessern und die Toleranz gegenüber Verunreinigungen ermöglicht die direkte Verwendung des linearisierten Vektors und des Inserts für die Rekombinationsklonierung ohne Aufreinigung, was die experimentellen Schritte erheblich vereinfacht. Produktvorteile Multi-Fragment-Spleißklonierung kann an fast jeder Position eines beliebigen Vektors durchgeführt werden; Die Restriktionsstelle, die das Insert selbst trägt, muss nicht berücksichtigt werden;