Die ClonExpress-Technologie ist eine einfache, schnelle und hocheffiziente Technologie zur nahtlosen DNA-Klonierung. Sie ermöglicht die gerichtete Klonierung von Inserts an beliebiger Stelle in einem beliebigen Vektor. Der Vektor kann mit einer beliebigen Methode linearisiert werden; die Endsequenz des linearisierten Vektors wird am 5'-Ende des Vorwärts-/Rückwärts-Amplifikationsprimers für das Insert eingefügt, sodass das 5'- und das 3'-Ende des PCR-Produkts jeweils dieselbe Endsequenz (15–20 bp) wie der linearisierte Vektor aufweisen. Das PCR-Produkt und der linearisierte Vektor werden in einem bestimmten Verhältnis gemischt. Unter der Katalyse der Rekombinase kann die Transformation bei 37 °C für 30 Minuten durchgeführt werden, um das gerichtete Klonieren abzuschließen.
ClonExpress II ist ein Rekombinations-Klonierungskit der neuen Generation. Es verfügt über ein einzigartiges ligaseunabhängiges System, das den Selbstligationshintergrund des Vektors deutlich reduziert, wodurch die Erfolgsrate mehr als 95 % erreichen kann. Ein hochoptimierter Reaktionspuffer und die verbesserte Rekombinase Exnase II können die Rekombinationseffizienz und die Toleranz gegenüber Verunreinigungen erheblich verbessern. Diese Eigenschaften ermöglichen es, linearisierte Vektoren und Inserts direkt und ohne Reinigung für die rekombinante Klonierung zu verwenden, was die Versuchsabläufe erheblich vereinfacht.
Eigenschaften
Gute Leistung: Keine Ligase, keine Selbstligation, Erfolgsquote >95 %
Breite Kompatibilität: Effiziente Klonierung von DNA-Fragmenten von 50 bp bis 10 kb; anwendbar für einzelne Fragmente
Weitere Merkmale: Die Restriktionsstellen der Insertfragmente müssen nicht berücksichtigt werden
Software-Unterstützung: Bereitstellung der Online-Software „CE Design“ zum Primer-Design
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