Reagenzkit / als Lösung E.Z.N.A.®

für PCRNukleinsäureBakterien

Isolierung von Plasmid-DNA mit niedrigem Endotoxingehalt (<1EU/µg) aus bis zu 5 ml Bakterienkulturen mit Spin-Mini-Säulen Übersicht Plasmide, die mit herkömmlichen Reinigungsverfahren isoliert werden, enthalten in der Regel hohe Mengen an Endotoxinen (auch bekannt als Lipopolysaccharide oder LPS), die die nachfolgenden Transfektionsexperimente erheblich stören können. Für Plasmide mit hoher Kopienzahl können bis zu 5 mL und für Plasmide mit niedriger Kopienzahl bis zu 10 mL der Übernachtkulturen verwendet werden. Das E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit I integriert einen effizienten Endotoxin-Entfernungsschritt in das Plasmid-Reinigungsverfahren, um qualitativ hochwertiges Transfektionsplasmid (<0,1 EU/µg) für eine effiziente Transfektion herzustellen. Die Bakterienzellen werden mit der alkalischen SDS-Lysemethode lysiert. Das gereinigte Zelllysat wird dann mit ETR-Reagenz behandelt, um die Endotoxine effizient zu entfernen. Nach Einstellung der Bindungsbedingungen wird das Zelllysat auf die HiBind®-DNA-Säule aufgetragen und die gereinigte DNA von der Säulenmembran eluiert. Schnell - 30 Minuten oder weniger Sicher - keine Phenol/Chloroform-Extraktionen Vielseitig - Spin- und Vakuumformate verfügbar Hochwertig - Endotoxine werden effizient reduziert (<0,1 EU/µg) Spezifikationen MERKMALE - SPEZIFIKATIONEN Nachgeschaltete Anwendung - Empfindliche Transfektion von Zelllinien; Gentherapie usw. Ausgangsmaterial - 1-5 mL LB-Kultur mit OD600 zwischen 2 und 3; oder gleichwertig Plasmid-Typ - High-Copy, Low-Copy, Cosmid-DNA Verarbeitungsmodus - Manuell, Zentrifugation Durchsatz - 1 - 24 DNA-Bindungstechnologie - Silica-Mini-Spin-Säule Lysat-Reinigungsmethode - Zentrifugation Verarbeitungszeit - <30 Minuten Ausbeute - 15-25 µg bei hoher Kopienzahl; 0,1-5 µg bei niedriger Kopienzahl Sonstiges - Einschließlich Endotoxin-Entfernungsschritt