Testkit für Forschungszwecke RE10070

SerumPlasmaELISA

Dieser ELISA-Kit verwendet das Competitive-ELISA-Prinzip. Die in diesem Kit enthaltene Mikro-ELISA-Platte wurde mit SPH vorbeschichtet. Standardlösungen oder Proben werden in die entsprechenden Vertiefungen der Mikro-ELISA-Platte gegeben und dann mit einem Biotin-konjugierten Antikörper, der spezifisch für SPH ist, beschichtet. Anschließend wird Avidin, das mit Meerrettichperoxidase (HRP) konjugiert ist, in jede Vertiefung der Mikrotiterplatte gegeben und inkubiert. Danach wird eine TMB-Substratlösung zugegeben. Die Enzym-Substrat-Reaktion wird durch Zugabe von Schwefelsäurelösung beendet, und der Farbumschlag wird spektrophotometrisch bei einer Wellenlänge von 450 nm ± 10 nm gemessen. Die Konzentration von SPH in den Proben wird dann durch Vergleich der OD der Proben mit der Standardkurve bestimmt. Technische Daten Da die OD-Werte der Standardkurve je nach den Bedingungen der tatsächlichen Testdurchführung (z. B. Bediener, Pipettiertechnik, Waschtechnik oder Temperatureffekte) variieren können, sollte der Bediener für jeden Test eine Standardkurve erstellen. Typische Standardkurven und Daten werden im Folgenden nur als Referenz angegeben. Genauigkeit Intra-Assay-Präzision (Präzision innerhalb eines Assays): 3 Proben mit niedrigem, mittlerem und hohem Gehalt wurden jeweils 20 Mal auf einer Platte getestet. Inter-Assay-Präzision (Präzision zwischen Assays): 3 Proben mit niedrigem, mittlerem und hohem Gehalt wurden auf 3 verschiedenen Platten getestet, jeweils 20 Wiederholungen auf jeder Platte. Wiederfindungsrate Die Wiederfindungsrate von aufgestockten Proben in drei verschiedenen Konzentrationen über den gesamten Assaybereich wurde in verschiedenen Matrices bewertet. Linear Die Proben wurden mit hohen Konzentrationen von Zielproteinen versetzt und mit Referenzstandard und Probenverdünnungsmittel verdünnt, um Proben mit Werten innerhalb des Assaybereichs zu erhalten.