Protease Reagenz ETR-HMM-0004

EnzymeBiochemiefür Forschungszwecke

Übersicht
Die neutrale Protease (NP) ist ein Enzym, das Peptidbindungen unter neutralen Bedingungen hydrolysiert und Peptide sowie freie Aminosäuren bildet. Ihre Substratspezifität und milden Reaktionsbedingungen eignen sich für analytische Aktivitätsbestimmungen im Labor.

Prinzip
Das Reagenz ermöglicht die Messung der NP-Aktivität durch Katalyse der Caseinhydrolyse zur Freisetzung von Tyrosin unter neutralen Bedingungen. Tyrosin reduziert Phosphomolybdatverbindungen und bildet in alkalischem Medium einen wolframblauen Komplex. Der Chromophor weist eine charakteristische Absorption bei 680 nm auf; die NP-Aktivität wird über die Absorptionsänderung (ΔA) mittels der Folin-Methode und einer Tyrosin-Standardkurve bestimmt.

Produktdetails

• Produktname: Reagenz zur Bestimmung der Aktivität der neutralen Protease (NP) (Mikroplattenleser)
• Katalog-Nr.: ETR-HMM-0004
• Anwendbare Geräte: Mikroplattenleser
• Anzahl testbarer Proben: 50 Proben
• Format / Kompatibilität: 96-Well-Platte
• Detektionszeit: 5 h (für 50 Proben)
• Detektionsmethode: Folin-Methode
• Spektrale Parameter: Messung bei 680 nm
• Signalantwort: Inkrementell
• Standard: Tyrosin
• Referenzgleichung: y = 0.8108x + 0.0072 (R2 = 0.9999)
• Linearer Messbereich: 0,05–1,2 μmol/mL

Technische Spezifikationen

• Proben-Durchsatz: Für Stapelverarbeitung von bis zu 50 Proben pro Kit auf 96-Well-Platte ausgelegt
• Empfindlichkeit: Linearer Ansprechbereich innerhalb des angegebenen Tyrosinbereichs
• Messung: Absorption bei 680 nm
• Kompatibilität: Standard-Mikroplattenleser, die 680 nm messen können

Verfahrenshinweise

• Bei kleiner gemessener ΔA die erste Reaktionsschrittzeit auf 15–25 Minuten verlängern und Berechnungen entsprechend anpassen
• Standardkurve mit dem bereitgestellten Tyrosinstandard vorbereiten; Lineariät vor Probenmessung prüfen
• Geeignete Leerwerte und Kontrollen durchführen, um Matrixeffekte auszugleichen

Lagerung und Sicherheit

• Reagenzien gemäß Herstellerangaben lagern (Etikett beachten) und wiederholte Gefrier‑/Auftauzyklen vermeiden
• Nur zur in vitro Verwendung im Labor; institutionelle Biosicherheits- und Entsorgungsrichtlinien beachten
• Übliche Vorsichtsmaßnahmen beim Umgang mit biochemischen Reagenzien einhalten