Testkit für Forschungszwecke HTRF

für Entzündungskrankheitenfür InfektionskrankheitenOnkologie

Der HTRF-Kit für humanes IL1 alpha ist für die Quantifizierung der Freisetzung von humanem IL1 alpha im Zellüberstand bestimmt. Übersicht IL1 alpha, auch bekannt als Hämatopoietin 1, ist ein proinflammatorisches Zytokin, das hauptsächlich von aktivierten Makrophagen sowie epilialen und endolialen Zellen produziert wird. Seine Hauptaufgabe ist die Erhaltung und der Schutz der Barrierefunktion der Haut. Als Reaktion auf eine Infektion stimuliert IL1 alpha die Fibroblastenproliferation, erhöht die Zahl der Neutrophilen im Blut und aktiviert die Lymphozytenproliferation. Die Bewertung von Serumproben erfordert häufig eine erhöhte Empfindlichkeit. In einigen Fällen können AlphaLISA-Assays eine ausreichende Empfindlichkeit aufweisen, um den Nachweis geringer Mengen von Analyten im Serum oder Plasma zu ermöglichen. HTRF-Assays bieten viele Vorteile gegenüber anderen Technologien: Homogenes Add-and-Read-Format Keine Waschschritte Niedriger Hintergrund Unkomplizierte Miniaturisierung von 96- oder 384-Well-Mikroplatten zu Assays mit hoher Dichte assay-Formaten wie 384-Well Low Volume und 1536-Well-Platten Stabiles Signal, das Flexibilität bei der Auslesezeit oder der Größe der Assays bietet Assay-Prinzip Der Zellüberstand, die Probe oder der Standard werden direkt in die Assay-Platte für die Detektion mit HTRF®-Reagenzien gegeben (weiße Low-Volume-Platte mit 384 Vertiefungen oder Revvity Low-Volume-Platte mit 96 Vertiefungen in 20 µl). Die mit dem HTRF-Donor und -Akzeptor markierten Antikörper werden vorgemischt und in einem einzigen Dispensierschritt zugegeben, um das Assayverfahren weiter zu rationalisieren. Der Assay kann bis zu einem Format von 1536 Vertiefungen durchgeführt werden, indem die Größe der einzelnen Zugabevolumina einfach proportional angepasst wird. Analyse der Assay-Daten Die logistische 4-Parameter-Kurve (4PL) wird in der Regel für die Anpassung einer ELISA-Standardkurve empfohlen.