Färbelösungs-Reagenz TB (Ziehl-Neelsen)

Farbstofffür Mikrobiologiefür Mikroskopie

Vorgesehene Verwendung: Zur Identifizierung säurefester Bakterien der Gattung Mycobacterium, zu der das Tuberkulose-verursachende Mycobacterium tuberculosis gehört. Prinzip: Dieses Färbekit basiert auf der Ziehl-Neelsen-Färbung (einer Karbolfuchsinlösung), die von der WHO empfohlen wird. Säurefeste Bakterien wie Mycobacterium tuberculosis und Mycobacterium leprae sind aufgrund ihrer lipoiden Kapsel in der Zellwand schwer zu färben. Sobald jedoch die lipoide Kapsel mit einem verstärkten Farbstoff wie Karbolfuchsin gefärbt ist, wird die neu gebildete Verbindung der Entfärbung durch Säure-Alkohol widerstehen und die ursprünglich gefärbte Farbe (rot) beibehalten, die leicht von anderen Mikroorganismen unterschieden werden kann, die noch den blauen Gegenfarbstoff adsorbieren. Methoden: 1. Fixieren Sie den Abstrich mit einer Flamme und fügen Sie dann Karbolfuchsin hinzu. Langsam erhitzen und die Färbung 5 Minuten lang dampfen lassen. Vermeiden Sie das Verdampfen bis zur Trocknung oder das Kochen. 2. Warten Sie einige Minuten zum Abkühlen, spülen Sie vorsichtig mit Wasser (Tupfen Sie den Objektträger vorsichtig mit Löschpapier ab) 3. Entfärben Sie 2 Minuten lang mit Säure-Alkohol. 4. Spülen Sie vorsichtig mit Wasser (wenn die rote Farbe noch auf der Oberfläche der Probe sichtbar ist, fügen Sie erneut Säure-Alkohol hinzu, bis das Rot vollständig entfärbt ist). 5. Tragen Sie Methylenblau für 30 Sekunden auf. Spülen Sie vorsichtig mit Wasser und lassen Sie es an der Luft trocknen. Untersuchen Sie den fertigen Objektträger unter einem Mikroskop. Spezifikationen: Inhalt: 3 Fläschchen à 100 ml/Kit, 3 Flaschen à 250 ml/Kit, 3x(6 Flaschen à 500 ml)/Kit Komponenten: - Karbolfuchsin: 1x100ml, 1x250ml, 6x500ml (Karbolfuchsin, Phenol) - Säure-Alkohol: 1x100ml, 1x250ml, 6x500ml (Ethanol, Salzsäure) - Methylenblau: 1x100ml, 1x250ml, 6x500ml (Methylenblau) Vorsichtsmaßnahmen: 1. Verschließen Sie nach jedem Gebrauch sofort die Reagenzflasche, um Verdampfung zu vermeiden. 2. Bei Sputumproben sollte der Abstrich ausreichend verdickt sein, um die Nachweisrate zu erhöhen. Bei einem dickeren Abstrich muss die Gegenfärbezeit kontrolliert werden. Die mikroskopische Untersuchung wird beeinträchtigt, wenn der Hintergrund zu dunkel ist. 3. Gelegentlich kann die Intensität der roten Färbung für dasselbe säurefeste Bakterium unterschiedlich sein. Beachten Sie den Unterschied in der Intensität der roten Färbung bei der Beobachtung. 4. Für die Lagerung des Kits vermeiden Sie die Exposition gegenüber extrem hohen oder niedrigen Temperaturen und Sonnenlicht. 5. Beim Färben säurefester pathologischer Objektträger wird die Heizfärbemethode empfohlen. Für bessere Ergebnisse sollte die Färbezeit von Karbolfuchsin länger als 5 Minuten sein. Erwartete Ergebnisse: Säurefeste Mycobacterium-Arten erscheinen leuchtend rot, während andere Bakterien und Zellen blau sind. Mycobacterium tuberculosis ist ein stäbchenförmiges (gerades oder gebogenes Stäbchen) grampositives Bakterium, etwa 1,3 bis 3,5 µm lang und 0,3 bis 0,5 µm breit. Es bildet keine Geißeln oder Sporen. Mycobacterium kann leicht mit säurefester Färbung gefärbt werden. Unter dem Mikroskop können säurefeste Bakterien als Stäbchen in Klumpen oder als Partikel bei der Metamorphose erscheinen. Auf niedrigerer Zellebene können bestimmte spezielle Formen wie "V", "Y" und "T" durch die Verbindung von 2-3 Zellen gebildet werden. - Zur Identifizierung säurefester Mycobacterium (z.B. M. tuberculosis) - Ziehl-Neelsen (Karbolfuchsin) Methode, von der WHO empfohlen - Kit-Inhalt: Karbolfuchsin, Säure-Alkohol, Methylenblau (verschiedene Volumina) - Vorsichtsmaßnahmen: Flaschen nach Gebrauch verschließen, Gegenfärbezeit kontrollieren, extreme Temperaturen vermeiden, Heizmethode empfohlen - Erwartetes Ergebnis: Säurefeste Bakterien färben sich rot, andere blau