Eine modifizierte basische Fuchsinfärbung (ohne Erhitzung) zum Nachweis von säurefesten Bakterien wie Mycobacterium tuberculosis.
Prinzip:
Dieses Färbeset basiert auf der von der WHO empfohlenen Ziehl-Neelsen-Färbung (eine Carbofulfuchsin-Lösung). Säurefeste Bakterien wie Mycobacterium tuberculosis und Mycobacterium leprae sind aufgrund ihrer Lipoidkapsel in der Zellwand schwer zu färben. Sobald die Lipoidkapsel jedoch mit einem verstärkten Farbstoff wie Carbolfuchsin angefärbt wird, widersteht die neu gebildete Verbindung der Entfärbung durch Säure-Alkohol und behält die ursprüngliche Farbe (rot), die leicht von anderen Mikroorganismen unterschieden werden kann, die immer noch die Gegenblaufärbung adsorbieren.
Methoden:
Kaltfärbung:
1. Ausstrich mit der Flamme fixieren und dann Carbolfuchsin zur Färbung für 5 Minuten oder länger (ohne Erwärmung) hinzufügen.
2. Vorsichtig mit Wasser abspülen (Objektträger vorsichtig mit Papiertüchern abtupfen)
3. 2 Minuten lang mit saurem Alkohol entfärben.
4. Vorsichtig mit Wasser abspülen (wenn noch rote Farbe auf der Oberfläche der Probe sichtbar ist, erneut sauren Alkohol hinzufügen, bis die rote Farbe vollständig entfärbt ist).
5. Methylenblau für 30 Sekunden auftragen. Vorsichtig mit Wasser abspülen und an der Luft trocknen lassen. Den fertigen Objektträger unter einem Mikroskop untersuchen.
Vorsichtsmaßnahmen:
1. Diese Methode wird auch bei Erhitzungsfärbung angewendet.
2. Wenn der Entfärber aufgebraucht ist, empfehlen wir, die Lösung von Baso zu kaufen.
3. Verschließen Sie die Reagenzflasche nach jedem Gebrauch sofort, um Verdunstung zu vermeiden.
4. Bei Sputumproben sollte der Abstrich richtig eingedickt werden, um die Nachweisrate zu erhöhen. Bei dickerem Abstrich muss die Gegenfärbezeit kontrolliert werden. Die mikroskopische Untersuchung wird beeinträchtigt, wenn der Hintergrund zu dunkel ist.
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