Testkit für die molekulare Diagnostik MOLgen

Candida albicansUrinfür Kliniken

das "MOLgen DNA Candida albicans S1 Kit" ist ein Assay-Kit für den Nachweis von Candida albicans DNA mittels Real-Time PCR-Methode. Einführung das "MOLgen DNA Candida albicans S1 Kit" ist für den Nachweis von Candida albicans DNA bestimmt, die aus klinischen Proben (Epithelzellenabstriche, Sperma, Prostataflüssigkeit, Urin) extrahiert wurde, unter Verwendung der Methode der Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) mit Fluoreszenzdetektion des amplifizierten Produkts. Set 1 ist für die Verwendung mit Block-PCR-Cyclern bestimmt: iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russland). Die Extraktion der DNA kann mit dem "Molgen Universal Extraction Kit" durchgeführt werden. Bei Verwendung von NA-Extraktionskits anderer Hersteller wird dringend empfohlen, eine von Adaltis hergestellte interne Kontrollprobe (IC) zu verwenden. Set 1 enthält Reagenzien, die für 96 Tests, einschließlich Kontrollproben, benötigt werden. Prinzip der Methode Die Echtzeit-PCR basiert auf dem Nachweis der von einem Reportermolekül erzeugten Fluoreszenz, die mit dem Fortschreiten der Reaktion zunimmt. Das Reportermolekül ist eine zweifach markierte DNA-Sonde, die sich spezifisch an die Zielregion der Erreger-DNA bindet. Das Fluoreszenzsignal erhöht sich aufgrund der Trennung von Fluoreszenzfarbstoff und Quencher durch die Taq-DNA-Polymerase-Exonukleaseaktivität während der Amplifikation. Die PCR besteht aus wiederholten Zyklen: Temperaturdenaturierung der DNA, Primer-Annealing und Synthese der komplementären Kette. Der Zyklusschwellenwert (Ct) ist eine Zykluszahl, bei der die in einer Reaktion erzeugte Fluoreszenz den Schwellenwert überschreitet und das Fluoreszenzsignal deutlich über den Hintergrund ansteigt. Das erhöhte Signal ist auf die Verwendung einer DNA-Hybridisierungssonde zurückzuführen, die für die gegebene DNA-Sequenz spezifisch ist