Die Kreatinkinase (CK) katalysiert die Reaktion zwischen Kreatinphosphat (CP) und Adenosin-5'-diphosphat (ADP) unter Bildung von Kreatin und Adenosin-5'-triphosphat (ATP). Letzteres wandelt Glukose in Anwesenheit von Hexokinase (HK) in Glukose-6-phosphat (G6P) um. G6P wird in Gegenwart von reduziertem Nikotinamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat (NADP) zu Gluconat-6P oxidiert, was durch die Glucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PDH) katalysiert wird. Die Umwandlung wird kinetisch bei 340 nm durch den Anstieg der Absorption aufgrund der Reduktion von NADP zu NADPH überwacht, der proportional zur CK-Aktivität in der Probe ist. Die Einbeziehung von N-Acetylcystein (NAC) in diese Methode ermöglicht eine optimale Aktivierung des Enzyms.
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