Dieses Verfahren basiert auf einer verbesserten enzymatischen Methode, die ursprünglich für die Bestimmung von Serum- und Urinkreatinin entwickelt wurde. Der Assay wird in zwei Stufen durchgeführt. In der ersten Stufe wird das Kreatinin in den ersten Minuten der Vorinkubation der Probe mit Kreatinase eliminiert. In der zweiten Phase wird durch die Zugabe von Creatininase die Reaktion eingeleitet, wobei Creatinin in der Probe in Gegenwart von Sarcosin-Oxidase (Sar OD) unter Bildung von Wasserstoffperoxid hydrolysiert wird:_x000D_
Kreatinin + H2O → Kreatin_x000D_
Sarcosin + H2O + O2 → H2O2 + Glycin + HCHO_x000D_
Das aus der Oxidase-Reaktion stammende Wasserstoffperoxid wird durch eine Reaktion vom Trinder-Typ quantifiziert, bei der das chromogene Derivat HTIB und 4-Aminoantipyrin (4-AA) in Gegenwart von Peroxidase (POD) kondensieren und einen roten Chinonimin-Farbstoff bilden
4-AA + HTIB → Chinonimin + H2O_x000D_
Die Farbentwicklungsrate ist proportional zur Kreatininkonzentration in der Probe.
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