Ölrot ist für die Färbung von neutralem Fett bestimmt.
Das Prinzip:
Es wird angenommen, dass die Färbung von Lipiden mit den physikalischen Eigenschaften der Lösung oder der Adsorption zusammenhängt. Farbstoffe weisen in lipoiden Substanzen von gefrorenem Gewebe eine größere Löslichkeit auf als in ursprünglichen Lösungsmitteln. Daher wandern die Farbstoffe während der Färbung aus den organischen Lösungsmitteln in die Lipide ein, was zu einer Färbung der Lipide führt.
Methoden:
1. Gefrorenes Gewebe auf eine Dicke von 6-10μm schneiden, kurz in destilliertem Wasser abspülen.
2. Spülen Sie das Gewebe 20-30 Sekunden lang in 60 %igem Isopropanol.
3. Bereiten Sie eine Arbeitslösung von Oil Red O mit 6 mL Oil Red O-Stammlösung und 4 mL entionisiertem Wasser vor. Gut mischen und 10 Minuten stehen lassen. Färben Sie das Gewebe 5 bis 10 Minuten lang in Ölrot O-Arbeitslösung.
4. Einige Sekunden lang in 60%igem Isopropanol spülen, um überschüssige Färbung zu entfernen. Mit destilliertem Wasser abspülen.
5. Kerne in Mayerscher Hämatoxylinlösung färben.
6. Die Objektträger einige Sekunden lang in 1%iger Salzsäure differenzieren.
7. Blau in Leitungswasser oder in verdünnter Lithiumcarbonatlösung für 10 Minuten. Überschüssiges Wasser rundherum entfernen.
8. Mit Arabinan oder Glyzerin-Gelee montieren.
Vorsichtsmaßnahmen:
1. Färben Sie zur Darstellung von Lipiden gefrorenes Gewebe anstelle von Paraffingewebe, da Lipide in organischen Lösungsmitteln leicht löslich sind.
2. Das für die Lipidfärbung verwendete gefrorene Gewebe sollte nicht zu dünn sein. Andernfalls würde der Lipidgehalt verloren gehen.
3. Die Gegenfärbezeit in Mayer-Hämatoxylin sollte nicht zu lang sein.
4. Die Färbung hält nicht allzu lange an, also beobachten und fotografieren Sie so schnell wie möglich.
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