Dieses Kit basiert auf der von der WHO empfohlenen Ziehl-Neelsen-Methode und ist eine chemische Färbung für den Nachweis von säurefesten Bakterien wie Mycobacterium tuberculosis.
Prinzip:
Säurefeste Bakterien wie Mycobacterium tuberculosis und Mycobacterium leprae sind aufgrund ihrer Lipoidkapsel in der Zellwand schwer zu färben. Wenn die Lipoidkapsel jedoch mit einem verstärkten Farbstoff wie Carbolfuchsin angefärbt wird, widersteht die neu gebildete Verbindung der Entfärbung durch Säure-Alkohol und behält die ursprüngliche Farbe (rot), die leicht von anderen Mikroorganismen unterschieden werden kann, die immer noch die Gegenblaufärbung adsorbieren. Phenol ist ein Beizmittel und kann die Färbefähigkeit verbessern.
Methoden:
1. Gewebe entparaffinieren, Carbolfuchsin zugeben, mit kleiner Flamme erhitzen und die Färbung 5-10 Minuten lang dampfen lassen. Vermeiden Sie zu trockene oder kochende Verdampfung.
2. Nach dem Abkühlen vorsichtig mit Wasser abspülen. Den Objektträger vorsichtig mit Papiertüchern abtupfen.
3. Entfärben Sie für 1~2 Minuten mit saurem Alkohol.
4. Vorsichtig mit Wasser abspülen (wenn das Rot auf der Oberfläche der Probe noch sichtbar ist, erneut sauren Alkohol hinzufügen, bis das Rot vollständig entfärbt ist. Dann weiter mit Wasser abspülen).
5. Methylenblau für 20-30 Sekunden auftragen. Vorsichtig mit Wasser abspülen.
6. 5-10 Sekunden lang in 95%igem Ethanol differenzieren.
7. In absolutem Ethanol dehydrieren und mit Xylol reinigen. Mit Trägermaterial montieren.
8. Alternativ kann der oben beschriebene Dehydratisierungsschritt durch Lufttrocknung ersetzt werden.
9. Untersuchen Sie den fertigen Objektträger unter einem Ölimmersionsobjektiv.
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