Die Alcianblau-Färbung (pH 2,5) ist für die Anfärbung von sauren Schleimstoffen, die Identifizierung von Schleimepitheliomen und Schleimstoffen in Tumoren sowie die Anfärbung von Cryptococcus neoformans-Kapseln bestimmt.
Das Prinzip:
Alcianblau ist die spezifischste Färbung zum Nachweis saurer Schleimstoffe. Dieser Anionenfarbstoff bildet eine elektrovalente Bindung mit der Säuregruppe. Mit Alcianblau lassen sich verschiedene Schleimstoffe bei unterschiedlichen pH-Werten unterscheiden und identifizieren. Bei pH 1 wird die Sulfongruppe (OSO3H) angefärbt; bei pH 2,5 wird die Carboxylgruppe gut angefärbt. Die Kapsel von Cryptococcus neoformans besteht aus Schleimsubstanz und kann mit Alcianblau blau angefärbt werden. Andere Schimmelpilze und ihre Kapseln können nicht angefärbt werden.
Methoden:
1. Gewebe in 10%igem Formaldehyd fixieren. Auf übliche Weise dehydrieren und einbetten.
2. Schnitte in entionisiertem Wasser entparaffinieren.
3. 10-20 Minuten in Alcianblau-Lösung einlegen und kurz mit Wasser abspülen.
4. Gegenfärbung in Nuclear Fast Red Lösung für 5-10 Minuten und kurz mit Wasser abspülen.
5. Auf übliche Weise dehydrieren und abtrocknen. Mit Trägermaterial montieren.
Vorsichtsmaßnahmen:
1. Die Alcianblaulösung enthält 3 % Essigsäure, um den pH-Wert bei 2,5 zu halten. Thymol wird als Konservierungsmittel für Mehltau Prävention verwendet. Alcianblau-Lösung und Nuclear Fast Red-Lösung sollte bei 4℃ nach der Konstitution gelagert werden.
2. Die Alcianblaulösung ist eine starke Färbung mit stabiler Farbe. Eine Überfärbung ist auch nach langer Färbung nicht zu befürchten.
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