Die Alanin-Aminotransferase (ALT/GPT) katalysiert die Übertragung der Aminogruppe von Alanin auf Alpha-Ketoglutarat und bildet dabei Glutamat und Pyruvat. Letzteres wird von der Laktatdehydrogenase (LDH) in Gegenwart von reduziertem Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid (NADH) zu Laktat reduziert. Die Reaktion wird kinetisch bei 340 nm durch die Abnahme der Absorption aufgrund der Oxidation von NADH zu NAD+ überwacht, die proportional zur ALT-Aktivität in der Probe ist.
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