Tuberkulose-Testkit cobas® MTB-RIF/INH

DiagnoseMycobacterium tuberculosisChlamydia trachomatis

Übersicht
cobas® MTB-RIF/INH für die Anwendung auf den cobas® 5800/6800/8800 Systemen ist ein automatisierter, qualitativer In-vitro-Diagnostiktest, der Echtzeit‑PCR zur direkten Erkennung von Rifampicin‑Resistenz‑assoziierten Mutationen im rpoB‑Gen und Isoniazid‑Resistenz‑assoziierten Mutationen in den Genen katG und inhA von Mycobacterium tuberculosis aus humanen respiratorischen Proben verwendet. Der Test ist als Reflextest zusammen mit cobas® MTB vorgesehen und dient zusammen mit Kultur und Antibiotika‑Empfindlichkeitstests als Hilfsmittel zur Diagnose von multiresistentem M. tuberculosis (MDR‑TB).

Verwendungszweck
Zur Analyse von Rohsputum sowie digeriertem/dekontaminiertem (N‑acetyl‑L‑cystein/NaOH) Sputum und Bronchoalveolarlavage (BAL), die mittels cobas® MTB positiv für MTBC getestet wurden.

Prinzip / Methode
Probenliquefaktion und Mykobakterien‑Inaktivierung erfolgen mit cobas® Microbial Inactivation Solution (MIS), gefolgt von Sonikation. Die cobas® 5800/6800/8800 Systeme führen vollautomatisierte Probenvorbereitung (Nukleinsäureextraktion und -reinigung), Echtzeit‑PCR‑Amplifikation, Detektion und automatisierte Ergebniszuweisung (positiv, negativ, ungültig) durch.

Probenvorbereitung und Extraktion
Die Freisetzung von Nukleinsäure erfolgt durch chemische (MIS, cobas® omni Lysis Reagent), enzymatische (Proteinase) und physikalische (Sonikation) Disruption. Freigesetzte Nukleinsäure bindet an die Siliciumoberfläche hinzugefügter magnetischer Glaspartikel; Verunreinigungen und PCR‑Inhibitoren werden durch Waschschritte entfernt und die gereinigte Nukleinsäure bei erhöhter Temperatur eluiert.

PCR und Detektion
Zielspezifische Primer amplifizieren die Genregionen. Mutationsspezifische Sonden, markiert mit Fluoreszenzreportern, ermöglichen die gleichzeitige Detektion des MTB‑Komplexes, von Rifampicin‑ und Isoniazid‑Resistenzen in fünf Detektionskanälen (Rifampicin‑Mutationen detektiert in drei Kanälen). Der Mastermix enthält dUTP (anstelle von dTTP) und AmpErase (Uracil‑DNA‑Glycosylase) zur Kontrolle von Kontaminationen durch Carry‑over. Die Echtzeitdetektion misst die Fluoreszenz der Reporter während der PCR.

Nachgewiesene Zielsequenzen

• MTB‑Komplex (einziges Genkopie‑Ziel)
• Rifampicin‑Resistenz‑assoziierte Mutationen (rpoB‑Gen) — 18 Mutationen detektiert
• Isoniazid‑Resistenz‑assoziierte Mutationen (katG‑Gen und inhA‑Promotorregion) — 7 Mutationen detektiert

Vorgesehene Instrumente / Workflow
Vorgesehen für die Verwendung auf cobas® 5800, cobas® 6800 und cobas® 8800. Die Systeme bieten automatisierte Probenhandhabung, Nukleinsäureextraktion, PCR‑Amplifikation, Detektion und automatisierte Ergebnisberichterstattung.

Bestellinformationen
Materialnummer | Materialbeschreibung
09040617190 | KIT COBAS 58/68/8800 MTB-RIF/INH 192T

Regulatorischer Hinweis
Zur In-vitro‑Diagnostik.